硫酸庆大霉素

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  硫酸庆大霉素(Gentamicin sulfate salt)是一种广谱氨基糖苷类抗生素,对大量革兰阴性细菌及革兰阳性菌都有良好抗菌能力,甚至包括某些β-内酰胺敏感的抗万古霉素(VRE)肠球菌,和耐糖肽抗生素的一些“超级细菌”。其抑菌机理在于通过与细菌核糖体30S亚基结合导致密码子错误,阻断肽酰-tRNA从A位点到P位点的转运,从而抑制细菌蛋白质的合成。

硫酸庆大霉素在实验室中应用非常普遍:

1)微生物学研究,常用于药敏实验筛选敏感性细菌;

2)细胞培养内抑制细菌污染,有效浓度为 0.5 -50 µg/mL;

3)分子生物学研究,常用来选择性筛选携带庆大霉素抗性基因的阳性克隆,常用使用浓度15 µg/ml。别名

庆大霉素硫酸盐 硫酸艮他霉素 硫酸正泰霉素 硫酸双生霉素英文名称 Gentamycin Sulfate

CAS:1405-41-0

分子式:C21H43N5O7·H2SO4

分子量:575.67

储存条件

2-8℃,有效期3年

理化性质

外观(性状)

白色至淡黄色粉末

酶活/效价

≥590IU/mg

溶解性

100 mg/mL Water

 水分(%):≤18.0

pH (4%, 水) 25℃:3.5-5.5

 

 抗菌机制:通过抑制细菌蛋白质的合成发挥杀菌作用,对多种革兰阴性菌和部分革兰阳性菌有较强抗菌活性。

敏感菌:

革兰阴性菌:如大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌等。

革兰阳性菌:如金黄色葡萄球菌(不包括耐甲氧西林菌株)等。

特点:对厌氧菌无效,细菌易对其产生耐药性,且与其他氨基糖苷类药物存在部分交叉耐药性。

 

使用说明

常规浓度范围:

 

多数细胞培养中,推荐浓度为 50-100 μg/mL(部分文献中以 “单位” 表示,1 mg 庆大霉素约相当于 1000 单位,即 50-100 单位 /mL)。

具体浓度需根据细胞类型调整:对敏感细胞(如某些干细胞)可适当降低至 25-50 μg/mL,对污染风险高的体系(如原代细胞)可短期提高至 100-200 μg/mL,但需避免长期高浓度使用。

使用方法:

通常以无菌溶液形式(如 100 倍浓缩液)添加到培养基中,与血清、其他添加剂混合后灭菌(注意:庆大霉素耐高温,可耐受高压蒸汽灭菌,但常规多以过滤除菌的浓缩液形式储存,避免反复灭菌影响活性)。

储存条件:浓缩液需避光、2-8℃冷藏保存,避免冷冻或高温导致失效。

注意事项

避免长期连续使用:

长期(超过 2-3 周)在培养基中添加庆大霉素可能导致细菌产生耐药性,同时少数细胞(如神经细胞、某些肿瘤细胞)可能对其累积毒性敏感,影响细胞状态(如形态改变、增殖减慢)。

不适用真菌 / 支原体污染:

庆大霉素仅对细菌有效,对真菌(如酵母菌、霉菌)或支原体污染无抑制作用。若怀疑存在支原体污染,需联用支原体清除剂(如泰乐菌素);真菌污染则需添加两性霉素 B 等抗真菌药物。

与特定实验的兼容性:

部分细胞功能实验(如细菌 - 细胞相互作用研究、抗生素耐药性相关实验)需避免使用庆大霉素,以免干扰实验结果。

对氨基糖苷类抗生素敏感的细胞(如内耳相关细胞、肾细胞)应慎用,可能影响细胞特异性功能。

无菌操作的基础地位:

庆大霉素仅为 “辅助预防” 手段,不能替代严格的无菌操作(如超净台使用、试剂灭菌、操作者手卫生等)。若已发生严重细菌污染,需及时丢弃污染细胞,而非依赖高浓度庆大霉素挽救(可能导致细胞状态不可逆损伤)。

抗生素

抗菌谱

细胞毒性

适用场景

硫酸庆大霉素

革兰阴性菌为主,部分革兰阳性菌

低(常规浓度)

常规培养、原代细胞

青霉素 + 链霉素

革兰阳性菌 + 部分革兰阴性菌

最常用基础组合,广谱预防

卡那霉素

类似庆大霉素,耐药性略低

稍高

对庆大霉素耐药的细菌污染预防

两性霉素 B

真菌

中(高浓度有毒)

真菌污染预防 / 处理

与其他常用抗生素的对比

 

庆大霉素的优势在于对革兰阴性菌(如常见的大肠杆菌污染)效果优于青霉素,因此常与青霉素 - 链霉素联用,互补抗菌谱。

 

 

产品仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

 

由于实验受多种因素影响具有不确定性,以上说明仅供参考,最终解释权归本公司所有。

 

数据及应用

适用场景

常规细胞培养维护:

用于基础培养基(如 DMEM、RPMI-1640 等)的添加,长期维持细胞培养环境的无菌状态,尤其适合实验室常规传代、扩增过程。

原代细胞培养:

原代细胞分离自组织,污染风险较高,添加庆大霉素可降低细菌污染概率,提高原代细胞的存活效率。

细胞实验前的短期处理:

在进行细胞转染、药物处理、病毒感染等实验前,若需保持细胞处于无菌状态但又需避免其他抗生素的干扰,庆大霉素是常用选择之一。

与其他抗生素联用:

常与青霉素、链霉素等组成 “抗生素 cocktail”(如青 - 链 - 庆大组合),扩大抗菌谱,增强对多种细菌的抑制效果(尤其针对可能存在的耐药菌)。

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