产品概述

本产品为MDCK细胞专用完全培养基，由天启顺技术团队针对MDCK细胞的生长特性精心优化而成。在基础培养基中添加优选比例的胎牛血清和抗生素，包含细胞生长所需的各种营养成分，开盖即用，无需额外配制，可维持MDCK细胞最佳的生长状态和功能特性。

产品成分

本产品为即用型完全培养基，包含以下成分：

基础培养基：DMEM（高糖）基础培养基（含L-谷氨酰胺、HEPES、酚红）

血清：10% 特级胎牛血清（经过MDCK细胞适应性测试）

抗生素：1% 青霉素-链霉素双抗

产品特点

小包装设计：125mL×4 规格，随用随取，避免大包装反复冻融带来的性能下降。

即开即用：无需额外添加血清、双抗等，开盖即可使用，简化操作流程。

严格质控：无菌、无病毒、无支原体、低内毒素，批次间稳定性高。

减少污染风险：无需自行配制和过滤，避免操作过程中引入污染。

适配性强：针对MDCK细胞特性优化，维持细胞良好生长状态和上皮细胞功能特性。

产品规格与质量控制

使用说明

预热：使用前将培养基置于室温或37℃水浴中预热，避免反复加热。

直接使用：本产品为完全培养基，无需额外添加任何成分，可直接用于细胞培养。

无菌操作：使用时注意无菌操作，避免污染。

培养条件：推荐在37℃、5% CO₂的培养箱中使用。

MDCK细胞培养关键提示

生长特性：贴壁上皮样细胞，倍增时间约2-3天，部分亚型（如MDCK.1）约14小时，传代周期2-3天

贴壁特性：贴壁紧密，细胞之间连接紧密，形成极性单层

培养基：DMEM + 10%FBS

关键难点：MDCK细胞特别难消化，胰酶消化时间需5-10分钟左右才能完全分散

传代方法（80%-90%密度）：

PBS润洗1-2次，去除残留血清

加入0.25%胰酶-EDTA，37℃消化约5-10分钟（细胞变圆脱落、可冲散时即为消化完全）

完全培养基终止消化（3倍体积），轻轻吹打脱落

1000rpm离心5分钟

按1:2至1:4比例传代

换液频率：每周2-3次

形态观察：正常呈上皮样、铺路石状排列；状态差时变扁、颗粒感增强、漂浮增多

密度控制：80%-90%及时传代，避免过密导致细胞老化

复苏注意：快速解冻（1-2分钟），24小时内勿移动培养瓶，24小时后换液去除死细胞

冻存液：完全培养液92% + DMSO 8%，或95%FBS+5%DMSO

代次管理：建议使用低代次细胞，定期进行支原体检测

悬浮培养：MDCK可驯化为悬浮细胞（susMDCK），用于流感病毒大规模生产，无需胰酶消化，使用无血清悬浮培养基

使用说明

使用操作

无需额外添加：本产品为全营养组分的培养基，如无特别需要，不用额外添加血清和双抗，可直接使用。

预热：使用前将培养基置于室温或37°C水浴中预热，避免反复加热。

细胞适应性：若从其他培养基更换为本培养基，建议逐步过渡（如先混合50%旧培养基，再逐渐提高比例），避免细胞应激。

无菌操作：配制和使用过程中需严格无菌，避免污染（建议定期检测培养基是否浑浊、变色）。

储存条件

完全培养基：4°C避光保存，有效期三个月。避免反复冻融或长时间室温放置，以防营养成分降解和污染。

重要提示

产品用途：仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

由于实验受多种因素影响具有不确定性，本说明书操作说明仅供参考，最终解释权归本公司所有。

数据及应用

本产品适用于使用MDCK细胞开展的各类研究，包括但不限于：

病毒学研究：流感病毒分离培养、病毒增殖、细胞病变效应研究

疫苗生产：流感疫苗研发与生产（悬浮MDCK细胞系广泛应用于疫苗工业）

上皮细胞生物学：细胞极性形成、细胞连接、紧密连接功能研究

转运生理学：离子转运、水通道、药物跨上皮转运机制

毒理学研究：肾毒性物质评估、产气荚膜梭菌ε毒素检测（MDCK.2亚型）

蛋白质加工研究：β-淀粉样前体蛋白形成及其蛋白水解产物分析

转染宿主：作为基因转染的宿主细胞

MDCK细胞 贴壁测试第六次传代后

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