DMEM基础培养基(高糖,不含HEPES,含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,含丙酮酸钠,含青霉素G钠盐,含硫酸链霉素)
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DMEM, high glucose,即DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle Medium)高糖培养基,是在MEM培养基基础上改良而来,目前已广泛应用于各种细胞的培养。DMEM高糖培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞。可用于多种哺乳动物原代细胞的培养,例如原代成纤维细胞、神经细胞、神经胶质细胞、HUVEC、平滑肌细胞等,也可以用于一些细胞系的培养,例如Hela、293、Cos-7及PC-12等。
本产品含多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等成分,不含蛋白质或生长因子,需根据细胞种类添加5-10%血清或无血清添加物使用。本产品是根据ATCC 30-2002货号改良的DMEM高糖培养基,含1.5 g/L碳酸氢钠,添加丙酮酸钠。
本产品经0.1 μm滤膜过滤除菌,pH 7.0-7.4,含25 mM D-葡萄糖,1.5g/L 碳酸氢钠,添加4.0 mM L-谷氨酰胺,1.0 mM 丙酮酸钠,添加双抗,含酚红指示剂,不含HEPES缓冲体系。
特点:
DMEM 与其他培养基的不同之处在于其含有相当于初始 Eagle 最低必需培养基 4 倍浓度的氨基酸和维生素。DMEM 最初采用低浓度葡萄糖 (1 g/L) 和丙酮酸钠配制,但通常在含/不含丙酮酸钠的高糖环境下使用。DMEM 不含蛋白质、脂质或生长因子。因此,DMEM 需要补充剂,通常添加 10% 胎牛血清 (FBS)。DMEM 使用碳酸氢钠缓冲系统 (3.7 g/L),因此需要 5–10% CO2 的环境来维持生理 pH 值。
一、基础成分
基础培养基的配方经过优化,具有以下特点:
营养成分:含全面的必需氨基酸、非必需氨基酸(如谷氨酰胺)、维生素(包括高浓度叶酸)、葡萄糖、丙酮酸(额外碳源)及矿物质,能满足细胞能量代谢和生物合成需求;
缓冲系统:依赖碳酸氢钠(通常 2.2 g/L)维持 pH 稳定,需在 5%-10% CO₂培养箱中使用,pH 范围约 7.2-7.4;
主要优势
广谱适用性:既能支持原代细胞(如成纤维细胞、上皮细胞、淋巴细胞),也能培养传代细胞系(如肿瘤细胞),尤其对悬浮细胞和半贴壁细胞的兼容性较好;
营养丰富:适用于代谢旺盛、增殖快的细胞,如大多数肿瘤细胞系、杂交瘤细胞、胚胎干细胞等,能为它们提供充足的能量。
稳定性强:缓冲系统在一定范围内可抵抗 pH 波动,适合长时间培养(如 7-10 天的原代细胞分离培养);
支持细胞分化与功能维持:相比高营养的增殖型培养基,其配方更利于原代细胞保持原有表型和功能(如肝细胞的代谢功能)。
使用说明
使用注意事项
CO₂浓度:需在 5% CO₂培养箱中使用,确保碳酸氢钠缓冲系统正常工作,维持 pH 稳定。
使用前预热:从冰箱取出后,应提前置于室温或37℃水浴中充分预热,避免温度骤变对细胞造成冲击。
严格无菌操作:开封使用时注意无菌,建议分装保存,避免反复冻融或污染。
注意组分稳定性:L-谷氨酰胺等成分会随时间降解,配制好的完全培养基应尽快使用 。
细胞适应性:若从其他培养基更换为本培养基,建议逐步过渡(如先混合 50% 旧培养基,再逐渐提高比例),避免细胞应激。
无菌操作:配制和使用过程严格无菌,避免污染(定期检测培养基是否浑浊、变色)。
储存条件:常温运输;2-8℃避光保存,有效期12个月。
重要提示
产品用途:仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。
由于实验受多种因素影响具有不确定性,本说明书操作说明仅供参考,最终解释权归本公司所有。
数据及应用
适用细胞类型与场景原代细胞培养
动物组织来源的原代成纤维细胞、上皮细胞(如皮肤、肾脏原代细胞);
造血系统细胞(如淋巴细胞、巨噬细胞)及骨髓基质细胞。
肿瘤细胞系培养
多种肿瘤细胞,尤其适合需要模拟体内微环境的肿瘤研究;
转化细胞系(如病毒转化的淋巴细胞)。
特殊实验需求
细胞毒性检测(药物筛选中,其稳定的环境利于准确评估细胞存活);
病毒培养(如某些逆转录病毒在该培养基中增殖效率较高);
长期细胞培养(如原代细胞的传代扩展或功能维持实验)。
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