McCoy's 5A Complete Medium(+HEPES)
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McCoy's 5A 完全培养基(含 HEPES)是在经典 McCoy's 5A 完全培养基基础上,额外添加 HEPES 缓冲剂形成的优化配方。它保留了 McCoy's 5A 对原代细胞和敏感细胞的良好支持能力,同时通过 HEPES 增强了 pH 稳定性,更适合复杂培养环境或对缓冲能力要求较高的实验场景。
McCoy‘s 5A完全培养基(含HEPES)的成分
成分为 McCoy‘s 5A 基础培养基+10%胎牛血清+1%双抗,含L-谷氨酰胺、HEPES缓冲剂、酚红,包含细胞生长所需的各种成分。
特点:
125mLx4小包装规格,随用随取。
无需额外添加,开盖即用,方便快捷。
无菌,无病毒,无支原体,低内毒素。
无需再次配置,减少污染风险。
一、基础成分
1. 基础框架:McCoy‘s 5A 基础培养基
营养成分:提供全面的必需与非必需氨基酸(含谷氨酰胺)、高浓度叶酸、低浓度葡萄糖(1 g/L)、丙酮酸及矿物质。
基础缓冲系统:含碳酸氢钠(约 2.2 g/L),依赖 5%-10% CO₂ 环境维持 pH 在 7.2-7.4。
2. 关键添加物:HEPES 缓冲剂
作用机制:为两性离子缓冲剂,在 pH 6.8-8.2 范围内起效,其缓冲能力不依赖 CO₂浓度。
常规浓度:通常添加 10-25 mM,可根据开放式操作或长时间培养等具体需求调整。
二、添加组成
完全培养基在基础培养基上已添加以下关键成分,支持定制。
血清:默认添加 10% 特级胎牛血清(比例 5%-20% 可调,支持无血清替代)。
抗生素(可选):常用组合为青霉素(100 U/mL)与链霉素(100 μg/mL)。
其他补充物(可选):可按需补充谷氨酰胺(终浓度 2 mM)或特定生长因子。
三、主要优势:增强的 pH 稳定性
相比不含 HEPES 的版本,本产品的核心优势在于:
抗 CO₂波动:在培养箱CO₂浓度不稳定或进行短时开放式操作时,能有效减少pH骤变。
支持多样化培养环境:适用于无CO₂培养箱、密闭容器培养或长时间不换液的实验。
保护敏感细胞:为对pH变化敏感的原代细胞或肿瘤细胞系提供更稳定的生长环境。
使用说明
使用注意事项
CO₂浓度:需在 5% CO₂培养箱中使用,确保碳酸氢钠缓冲系统正常工作,维持 pH 稳定。
无需额外添加: 本产品为全营养组分的培养基,如无特别需要不用额外再添加血清和双抗,可以直接使用。
细胞适应性:若从其他培养基更换为本培养基,建议逐步过渡(如先混合 50% 旧培养基,再逐渐提高比例),避免细胞应激。
无菌操作:配制和使用过程严格无菌,避免污染(定期检测培养基是否浑浊、变色)。
储存条件:完全培养基:4℃避光保存,有效期三个月,避免反复冻融或长时间室温放置(防止营养成分降解和污染)。
重要提示
产品用途:仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。
由于实验受多种因素影响具有不确定性,本说明书操作说明仅供参考,最终解释权归本公司所有。
数据及应用
适用细胞类型与实验场景
敏感细胞培养
原代细胞:如原代成纤维细胞、上皮细胞、骨髓基质细胞等;
悬浮 / 半贴壁细胞:如淋巴细胞、Jurkat 细胞、某些白血病细胞系。
特殊实验需求
长时间培养实验(如 7 天以上的原代细胞扩增);
高频操作场景(如药物筛选中频繁加样、取样);
野外或无 CO₂设备的临时培养(依赖 HEPES 维持 pH);
病毒培养或转染实验(减少环境波动对病毒复制或转染效率的影响)。
长期细胞培养(如原代细胞的传代扩展或功能维持实验)。
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