胶原蛋白酶 来源于溶组织梭菌
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产品名称:胶原蛋白酶 来源于溶组织梭菌
英文名称:Collagenase from Clostridium histolyticum
Cas号:9001-12-1
产品分类:酶和辅酶;Enzymes and Coenzymes
保存条件:-20℃
纯度:Type IV,≥125 CDU/mg
产品简介:
胶原酶IV包含至少7种蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织。胶原酶的使用浓度一般为0.1- 5 mg/ml,消化过程中可以搅拌以促进酶的消化。胶原酶在消化的过程中可以引起细胞的少量死亡,一般消化时间为15min至数小时。如果浓度发生变化那么消化时间可能更长。消化过程中首选的缓冲液为含钙离子和BSA的Krebs Ringer Buffer。在消化的过程中如果细胞大量死亡则需要降低酶量,同时可以加入0.5%BSA或5-10%血清来稳定细胞的状态和消化效果。
胶原酶的灭菌首先离心或者用0.8μm的滤器去掉不溶物。然后再用0.2μm的滤器过滤除菌。 盐酸苯甲脒和TLCK联合作用可以与该酶成分中大部分的蛋白酶结合而抑制其活性,但是他们却不会抑制胶原酶的活性。其中盐酸苯甲脒的浓度一般为1 mM,TLCK 的浓度一般为 0.100-0.135 mM。值得注意的是两者不能完全保证所有蛋白酶的活性均被抑制。
胶原酶(collagenase)是从溶组织梭状细胞芽孢杆菌提取制备的,主要水解结缔组织中胶原蛋白成分。当拟消化的组织较硬,内含较多结缔组织或胶原成分时,用胰蛋白酶解离细胞的效果较差,这时可采用胶原酶解离细胞法。 胶原酶仅对细胞间质有消化作用而对上皮细胞影响不大。因此适于消化分离纤维性组织、上皮及癌组织,可使上皮细胞与胶原成分分离而不受损害。常用剂量为最终浓度200U/ml(约为1mg/mL)或0.03%~0.3%。胶原酶分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝细胞专用胶原酶,要根据所要分离消化的组织类型选择胶原酶类型。
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