DMEM/F-12完全培养基 (不含HEPES)
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DMEM/F-12 完全培养基(不含 HEPES)是一种常用的哺乳动物细胞培养体系,由DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium) 与F-12基础培养基按 1:1 比例混合,并添加血清、抗生素等成分制成。与含 HEPES 的版本相比,其核心差异在于依赖传统碳酸氢钠缓冲系统维持 pH 稳定,适用于对 HEPES 敏感或实验条件可严格控制 CO₂浓度的细胞培养场景,尤其在常规贴壁细胞、肿瘤细胞系等培养中应用广泛。产品使用便捷,无需额外添加其他成分,开盖即用。省去客户自行配液的麻烦和污染风险。
DMEM/F-12完全培养基的成分
成分为DMEM与F-12基础培养基(1:1混合)+ 10%胎牛血清 + 1%双抗,含L-谷氨酰胺、酚红,包含细胞生长所需的各种成分;不含 HEPES。
特点:
125mLx4小包装规格,随用随取。
无需额外添加,开盖即用,方便快捷。
无菌,无病毒,无支原体,低内毒素。
无需再次配置,减少污染风险。
一、基础成分
基础培养基是完全培养基的功能基础,不含 HEPES 的 DMEM/F-12 具有以下关键特征:
1. 营养成分互补
融合了 DMEM 与 F-12 基础培养基的优势。
DMEM:提供高浓度氨基酸、维生素和葡萄糖(常规为 4.5 g/L,部分低糖版本 1.0 g/L),为细胞快速增殖提供支持。
F-12:富含微量元素(如锌、铜、硒)、核苷(如腺嘌呤、次黄嘌呤)和有机酸盐,满足细胞复杂的代谢需求。
综合优势:二者按 1:1 比例混合,营养组成更为均衡,可广泛适应多种细胞的生长。
2. 依赖碳酸氢钠缓冲系统
基础培养基中含有碳酸氢钠(通常浓度为 1.2-2.2 g/L)。
缓冲作用依赖于培养环境中的 5%-10% CO₂ 浓度,通过 “碳酸氢钠-CO₂” 平衡机制来维持培养基 pH 在 7.2-7.4。
系统优势:该系统更接近生理环境,对部分细胞的生理功能影响更小。
3. 无 HEPES 干扰
避免了 HEPES 缓冲剂可能带来的潜在影响。
适用于对 HEPES 敏感 的细胞(如部分原代细胞、神经细胞),可防止因 HEPES 毒性导致的细胞增殖抑制或分化异常。
二、添加组成
完全培养基在基础培养基的基础上添加以下关键成分,使其具备支持细胞生长的完整功能。血清、抗生素等特殊需求可支持定制。
1. 血清
类型:默认特级胎牛血清(其他等级可选)。
比例:默认添加 10%(可根据需求提供 5%-20% 的调整;无血清培养时可替换为血清替代物)。
作用:提供天然生长因子、激素、黏附因子及微量元素,促进细胞增殖与存活,并增强培养基缓冲能力。
2. 抗生素(可选)
常用组合:青霉素(100 U/mL)+ 链霉素(100 μg/mL)。
抗真菌选项:可添加两性霉素 B(0.25 μg/mL)。
注意:长期使用可能影响细胞活性,在洁净实验环境下可省略。
3. 其他补充物(可选)
谷氨酰胺:推荐终浓度 2 mM,为细胞提供氮源及能量代谢中间物。
特定生长因子:可根据细胞类型进行定制添加(如培养淋巴细胞时可添加 IL-2)。
三、适用细胞类型
DMEM/F-12 完全培养基(不含 HEPES)因营养均衡且无 HEPES 干扰,适用于多种常规细胞及对 HEPES 敏感的细胞:
肿瘤细胞系:如 HeLa(宫颈癌细胞)、A549(肺癌细胞)、MCF-7(乳腺癌细胞)等。
常规贴壁细胞:如成纤维细胞(NIH/3T3)、上皮细胞(MDCK)等。
对 HEPES 敏感的细胞:如部分原代神经元、胰岛 β 细胞。
干细胞培养(部分类型):如间充质干细胞(MSC),可减少对其分化潜能的干扰。
使用说明
使用注意事项
CO₂浓度:需在 5% CO₂培养箱中使用,确保碳酸氢钠缓冲系统正常工作,维持 pH 稳定。
无需额外添加: 本产品为全营养组分的培养基,如无特别需要不用额外再添加血清和双抗,可以直接使用。
细胞适应性:若从其他培养基更换为本培养基,建议逐步过渡(如先混合 50% 旧培养基,再逐渐提高比例),避免细胞应激。
无菌操作:配制和使用过程严格无菌,避免污染(定期检测培养基是否浑浊、变色)。
储存条件:完全培养基:4℃避光保存,有效期三个月,避免反复冻融或长时间室温放置(防止营养成分降解和污染)。
重要提示
产品用途:仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。
由于实验受多种因素影响具有不确定性,本说明书操作说明仅供参考,最终解释权归本公司所有。
数据及应用
DMEM/F-12 完全培养基(不含 HEPES)通过融合 DMEM 和 F-12 的营养优势,依托碳酸氢钠缓冲系统,为常规细胞及对 HEPES 敏感的细胞提供了接近生理环境的生长条件,尤其适合 CO₂浓度可严格控制的实验场景。
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