DMEM/F-12完全培养基 (含HEPES)
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DMEM/F-12 完全培养基(含 HEPES)是一种广泛应用于哺乳动物细胞培养的复合培养基,由DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium) 和F-12两种基础培养基按 1:1 比例混合而成,并添加 HEPES 缓冲剂及血清、抗生素等成分。其核心优势在于营养成分丰富且平衡,缓冲能力强,适用于多种敏感细胞(如原代细胞、干细胞、上皮细胞等)的培养,尤其适合需要稳定微环境的实验场景。产品使用便捷,无需额外添加其他成分,开盖即用。省去客户自行配液的麻烦和污染风险。
DMEM/F-12完全培养基(含HEPES)的成分
成分为DMEM与F-12基础培养基(1:1混合)+ 10%胎牛血清 + 1%双抗,含L-谷氨酰胺、酚红与HEPES缓冲剂,包含细胞生长所需的各种成分。
特点:
125mLx4小包装规格,随用随取。
无需额外添加,开盖即用,方便快捷。
无菌,无病毒,无支原体,低内毒素。
无需再次配置,减少污染风险。
一、基础成分
基础培养基是完全培养基的功能基础,含 HEPES 的 DMEM/F-12 具有以下关键特征:
1. 营养成分均衡
DMEM优势:提供较高浓度的氨基酸、维生素和葡萄糖(常规为 4.5 g/L,部分低糖版本为 1.0 g/L)。
F-12优势:富含微量元素(如锌、铜、硒)和核苷(如腺嘌呤、鸟嘌呤)。
综合效果:两者按 1:1 混合,营养全面,可满足细胞增殖、分化及功能维持的多重需求。
2. 含 HEPES 缓冲剂
添加浓度:通常为 10-25 mM。
缓冲特性:作为一种非碳酸盐缓冲剂,可在较宽 pH 范围(6.8-8.2)内稳定维持培养基 pH,且不受 CO₂ 浓度影响。
适用场景:
短期脱离培养箱的操作(如显微镜观察、换液)。
无法严格控制 CO₂ 浓度的设备(如某些低氧培养箱)。
对 pH 波动敏感的细胞(如神经细胞、干细胞)。
3. 其他基础成分
包含 13 种必需氨基酸与 11 种非必需氨基酸。
含谷氨酰胺(部分配方含 L-谷氨酰胺)、无机盐(如钙、镁、钾)及维生素(如叶酸、生物素),为细胞提供全面的代谢底物。
二、添加组成
完全培养基在基础培养基的基础上添加以下关键成分,使其具备支持细胞生长的完整功能。血清、抗生素等特殊需求可支持定制。
1. 血清
类型:默认特级胎牛血清(其他等级可选)。
比例:默认添加 10%(可根据需求提供 5%-20% 的调整;无血清培养时可替换为血清替代物)。
作用:提供天然生长因子、激素、黏附因子及微量元素,促进细胞增殖与存活,并增强培养基缓冲能力。
2. 抗生素(可选)
常用组合:青霉素(100 U/mL)+ 链霉素(100 μg/mL)。
抗真菌选项:可添加两性霉素 B(0.25 μg/mL)。
注意:长期使用可能影响细胞活性,在洁净实验环境下可省略。
3. 其他补充物(可选)
谷氨酰胺:推荐终浓度 2 mM,为细胞提供氮源及能量代谢中间物。
特定生长因子:可根据细胞类型进行定制添加(如培养淋巴细胞时可添加 IL-2)。
三、适用细胞类型
DMEM/F-12 完全培养基(含 HEPES)因营养均衡、缓冲能力强,适用于多种对环境敏感的细胞:
原代细胞:如成纤维细胞、肝细胞、肾细胞等。
干细胞:如胚胎干细胞(ESC)、诱导多能干细胞(iPSC)、间充质干细胞(MSC)。
上皮细胞:如乳腺上皮细胞、角膜上皮细胞。
神经细胞:如神经元、神经胶质细胞。
其他敏感细胞:如胰岛细胞、血管内皮细胞等。
使用说明
使用注意事项
CO₂浓度:需在 5% CO₂培养箱中使用,确保碳酸氢钠缓冲系统正常工作,维持 pH 稳定。
无需额外添加: 本产品为全营养组分的培养基,如无特别需要不用额外再添加血清和双抗,可以直接使用。
细胞适应性:若从其他培养基更换为本培养基,建议逐步过渡(如先混合 50% 旧培养基,再逐渐提高比例),避免细胞应激。
无菌操作:配制和使用过程严格无菌,避免污染(定期检测培养基是否浑浊、变色)。
储存条件:完全培养基:4℃避光保存,有效期三个月,避免反复冻融或长时间室温放置(防止营养成分降解和污染)。
重要提示
产品用途:仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。
由于实验受多种因素影响具有不确定性,本说明书操作说明仅供参考,最终解释权归本公司所有。
数据及应用
DMEM/F-12 完全培养基(含 HEPES)通过融合 DMEM 和 F-12 的营养优势,结合 HEPES 的稳定缓冲能力,为敏感细胞提供了均衡且低波动的生长环境,是原代细胞培养、干细胞研究及多种功能细胞实验的优选培养基。
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