昆虫细胞无血清培养基

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  昆虫细胞无血清培养基是一种专为昆虫细胞(如Sf9、Sf21、High Five等)设计的培养基,不含血清或其他动物源成分,适用于昆虫细胞悬浮培养、蛋白表达、病毒生产等应用。相较于传统含血清培养基,无血清培养基具有:批次稳定性高、减少污染风险、提高蛋白表达效率等优势。

 特点:

✅ 无血清 & 无动物源成分  

- 避免血清批次差异,提高实验可重复性。  

- 降低外源病原体(如支原体、病毒)污染风险。  

 

✅ 支持高密度细胞生长  

- 优化配方可支持Sf9细胞密度达 1.0×10⁷ cells/mL,High Five细胞达 5-7×10⁶ cells/mL。  

- 适用于杆状病毒表达系统(BEVS),提高重组蛋白产量。  

 

✅ 成分明确 & 可扩展性  

- 含必需氨基酸、维生素、脂类前体等,满足昆虫细胞生长需求。  

- 适用于生物反应器大规模培养,便于工业化生产。

  

使用说明

 

使用方法

(1)细胞适应(驯化)

- 直接适应:离心后更换为100%无血清培养基(适用于状态良好的细胞)。  

- 渐进适应:  

  1. 初始使用 50%原培养基 + 50%无血清培养基混合培养。  

  2. 逐步提高无血清比例(75%、100%),每代监测细胞活率(需≥90%)。  

 

(2)悬浮培养参数

| 参数         | 推荐条件                         

| 温度         | 27°C ± 0.5°C                         

| 摇床转速   | 110-130 rpm(TPP管)或60-95 rpm(转瓶) 

| CO₂          | 无需控制(部分产品需避免5% CO₂环境) 

| 接种密度  | Sf9: 1.0×10⁶ cells/mL;High Five: 0.5×10⁶ cells/mL 

 

(3)细胞冻存

- 冻存密度:  

  - 含血清冻存:15-20×10⁶ cells/mL(推荐40%培养基+50%FBS+10%DMSO)。  

  - 无血清冻存:30-40×10⁶ cells/mL(推荐45%培养基+45%上清+10%DMSO)。  

- 程序降温:使用冻存盒(-80°C 24h后转移至液氮)。  

 

注意事项

⚠ 细胞状态监测:  

- 定期检测活率(≥90%),避免过度生长导致死亡细胞增多。  

- 出现细胞聚集时,可低速离心(100g, 5min)去除碎片。  

 ⚠ 病毒表达优化:  

- 稳定传代3代后再感染杆状病毒,以提高蛋白产量。

 

重要提示

产品用途:仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

由于实验受多种因素影响具有不确定性,本说明书操作说明仅供参考,最终解释权归本公司所有。

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