MDCK犬肾细胞无血清培养基

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  MDCK(Madin-Darby Canine Kidney)细胞是一种犬肾上皮细胞系,广泛应用于病毒疫苗生产(如流感疫苗)、病毒学研究及药物筛选。传统培养方式依赖含血清培养基,但无血清培养基(Serum-Free Medium, SF批次稳定性高、减少污染风险、简化下游纯化等优势,正逐渐成为主流选择。  

 

特点: 

✅ 无血清,无动物源成分  

- 避免血清批次差异,提高实验可重复性。  

- 降低外源病原体(如支原体、病毒)污染风险。  

 

✅ 支持高密度培养  

- 优化配方可支持细胞密度达 5-8×10⁶ cells/mL(悬浮培养)。  

- 部分产品支持贴壁直接转悬浮,无需长期驯化。  

 

✅ 病毒生产效率高

- 适用于流感病毒(H1N1、H5N1等)、腺病毒等的高效扩增。  

 

✅ 低内毒素 ,无菌,无支原体,无病毒。

 

使用说明

使用方法

细胞适应(驯化)

 渐进适应法(推荐):  

  1. 初始使用 50%原培养基 + 50%无血清培养基 混合培养。  

  2. 每代提高无血清比例至100%,监测细胞活率(需≥90%)。 

 

 直接转换法:贴壁细胞可直接更换为无血清培养基。 

 

 病毒接种优化  

- 最佳接毒时间:细胞密度达 3-5×10⁶ cells/mL 时接种病毒。  

- 收获时间:通常感染后48-72小时(视病毒类型调整)。  

 

 

细胞冻存

- 冻存密度:  

  - 含血清冻存:15-20×10⁶ cells/mL(推荐40%培养基+50%FBS+10%DMSO)。  

  - 无血清冻存:30-40×10⁶ cells/mL(推荐45%培养基+45%上清+10%DMSO)。  

- 程序降温:使用冻存盒(-80°C 24h后转移至液氮)。  

 

 

注意事项

⚠ 细胞状态监测:定期检测活率(≥90%)和支原体污染(推荐PCR法)。  

⚠ 培养基储存:液体2-8°C避光保存,干粉需复溶后过滤除菌。  

⚠ 规模化生产:需优化生物反应器参数(如溶氧、搅拌速度)。  

 

重要提示

产品用途:仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

由于实验受多种因素影响具有不确定性,本说明书操作说明仅供参考,最终解释权归本公司所有。

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