神经元细胞培养基

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简要描述:

  神经元细胞培养基是一种基础培养基,设计用于纯产前和胚胎神经元细胞群的长期维持和成熟,在与 B-27 补充剂配合使用时无需星形胶质细胞滋养层。培养基适用于大多数神经元细胞应用。 特点: 神经保护机制

 

 

  神经元细胞培养基是一种基础培养基,设计用于纯产前和胚胎神经元细胞群的长期维持和成熟,在与  B-27 补充剂配合使用时无需星形胶质细胞滋养层。培养基适用于大多数神经元细胞应用。

 

特点:  

  神经保护机制:减少神经元过度激活和兴奋性毒性,显著提升原代神经元存活率(大鼠胚胎海马神经元培养4周存活率>90%)。  胶质细胞抑制:配合B-27添加剂时,培养5天后胶质细胞污染率<0.5%,实现高纯度神经元群落。

无需饲养层:独立支持神经元生长,简化培养流程。

 

添加剂依赖:需搭配专用添加剂以替代血清功能:  

     | 添加剂类型 | 适用细胞                  | 关键作用               |  

     |----------------|-------------------------------|---------------------------|  

     | B-27(含维A)  | 海马/皮层神经元              | 抗氧化、促突触成熟       |  

     | B-27(无维A) | 神经干细胞                   | 维持未分化状态           |  

     | N-2            | 神经母细胞瘤/PNS神经元       | 支持有丝分裂后细胞存活  

 

根据培养目的,需额外添加以下成分:

 

神经营养因子:促进神经元存活、分化和突触形成,如:

NGF(神经生长因子):支持外周神经元(如交感神经元、背根神经节神经元)。

BDNF(脑源性神经营养因子):促进中枢神经元(如海马、皮层神经元)的存活和突触成熟。

GDNF(胶质细胞源性神经营养因子):支持多巴胺能神经元等。

抗污染成分:常规添加青霉素(100 U/mL)+ 链霉素(100 μg/mL),避免细菌污染;真菌污染风险高时可加两性霉素 B。

能量与代谢支持:

谷氨酰胺(2 mM):神经元能量代谢的关键底物,但易分解产生氨(有毒性),因此更推荐使用稳定型 GlutaMAX™。

葡萄糖(5-25 mM):根据细胞类型调整(如成熟神经元对葡萄糖更敏感,需控制浓度)。

使用说明

神经元细胞培养的关键注意事项

无菌操作:神经元对污染极敏感,需在超净台严格无菌操作,培养基开封后需分装保存(避免反复冻融)。

培养环境:37℃、5% CO₂、95% 湿度的培养箱,定期校准温度和 CO₂浓度(CO₂影响 pH,过高 / 过低会导致细胞死亡)。

换液频率:神经元代谢较慢,无需频繁换液,通常每 3-4 天半量换液(保留一半旧培养基,避免营养剧烈波动)。

抑制杂细胞:原代培养中胶质细胞(如星形胶质细胞)增殖快,会竞争营养,可在培养第 3-5 天添加阿糖胞苷(Ara-C,终浓度 5-10 μM),抑制胶质细胞 DNA 合成(神经元不增殖,不受影响)。

避免机械刺激:换液时吸管需沿壁缓慢加液,避免直接冲击细胞;培养板移动时轻拿轻放,减少震动对神经元的损伤。

重要提示

产品用途:仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。

由于实验受多种因素影响具有不确定性,本说明书操作说明仅供参考,最终解释权归本公司所有。

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