BCA蛋白浓度测定试剂盒

产品货号	产品名称	包装
TP003	BCA Protein Assay Kit BCA蛋白浓度测定试剂盒	200T/500T

 

产品清单：

组分	包装（200T）	包装（500T）
BCA试剂（A）	40 ml	100 ml
BCA试剂（B）	1.2 ml	3 ml
蛋白标准（BSA）	20 mg	20 mg
蛋白稀释液	5 ml	13 ml

保存条件：

室温保存。蛋白标准配制成溶液后-20℃冻存。

产品介绍：

BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单、高稳定性、高灵敏度和高兼容性。

碱性条件下，蛋白将Cu²⁺还原为Cu⁺，Cu⁺与BCA试剂形成紫蓝色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween 不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂(DTT，巯基乙醇)和脂类的影响。

 

 

操作说明：

1. 蛋白标准品的准备

取0.8ml蛋白稀释液加入到一管蛋白标准(20mg BSA)中，充分溶解后配制成25mg/ml的蛋白标准溶液。配制后可立即使用，也可以-20ºC长期保存。

2. BCA工作液配制

根据样品数量，按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液，充分混匀。例如5ml BCA试剂A加100µl BCA试剂B，混匀，配制成5.1 ml BCA工作液。BCA工作液室温24 h内稳定。

3. 蛋白浓度测定

a. 将标准品按0、1、2、4、8、12、16、20µl加到96孔板的标准品孔中，加蛋白稀释液补足到20µl，相当于标准品浓度分别为 0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml。

b. 加适当体积样品到96孔板的样品孔中。 如果样品不足20µl，需加蛋白稀释液补足到20µl。请注意记录样品体积。

c. 各孔加入200µl BCA工作液，37℃放置5-10 min。

注：BCA法测定蛋白浓度时，颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低，适合在较高温度孵育，或适当延长孵育时间。

d. 用酶标仪测定A562 使用的 ，或540-595nm之间的其他波长的吸光度。

e. 根据标准曲线和使用的样品体积计算出样品的蛋白浓度。

注意事项：

1. 长期不用时，试剂盒可置于2-8°C保存，蛋白标准溶液可置于-20℃保存，如发现细菌污染则应丢弃。
2. BCA试剂在低温条件下出现结晶沉淀时，可37°C温育使其完全溶解，不影响使用。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单、高稳定性、高灵敏度和高兼容性。 碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+，Cu+与BCA试剂形成紫蓝色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween 不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂(DTT，巯基乙醇)和脂类的影响。