SDS-PAGE Loading Buffer,5×(with DTT) 5×蛋白上样缓冲液(含DTT)
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基本信息
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英文名称 |
SDS-PAGE Loading Buffer,5×(with DTT) |
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中文名称 |
5×蛋白上样缓冲液(含DTT) |
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货 号 |
TP002-01,TP002-02 |
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规 格 |
10ml,100ml |
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储存条件 |
保存在-20℃,1年。避免反复冻融。推荐分装后冻存。 |
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运输条件 |
冷冻运输 |
产品介绍
5×蛋白上样缓冲液(含DTT)产品简介
本产品专为SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)蛋白质上样而设计。主要组分为SDS、DTT、溴酚蓝及缓冲盐溶液。其中,SDS与蛋白质结合后,使蛋白质-SDS复合物携带大量负电荷,有效掩盖蛋白质自身电荷差异;同时,SDS可破坏分子内及分子间氢键,消除蛋白质二级和三级结构的影响。DTT则能还原半胱氨酸残基间的二硫键,进一步破坏蛋白质高级结构,从而消除不同蛋白之间的结构差异。经处理后,蛋白质(或其亚单位)在电泳中的迁移速率仅与其分子量相关。溴酚蓝作为电泳指示剂,可大致指示电泳进程的结束时间。
使用说明
- 按每40 μL蛋白样品加入10 μL上样缓冲液的比例进行5倍稀释;若蛋白样品浓度过高,可使用双蒸水适当稀释。
- 充分混匀后,于100℃水浴加热5~10分钟,使蛋白完全变性。
- 冷却至室温,以10000~14000 rpm离心2~5分钟,取上清液直接上样电泳。
注意事项
- 溴酚蓝指示条带的迁移位置与凝胶浓度相关:8%凝胶时约在30 kDa处,12%凝胶时约在20 kDa处,15%凝胶时约在10 kDa处。请根据目标蛋白的分子量判断并调整电泳时间。
- 本产品含DTT,具有一定毒性。操作时请穿着实验服,并佩戴一次性手套,注意安全防护。
- 上样缓冲液含溴酚蓝指示剂,其pH可能受保存温度影响。低温冻存时,溶液偶呈深棕色,此属正常现象,不影响产品性能。
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