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Vps34-IN-1  98%

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包装规格：25mg 50mg 100mg 250mg in glass bottle
产品简介：一种有效的，选择性的 III 类 Vps34 PI3K 抑制剂。Vps34-IN-1 通过重组昆虫细胞表达的 Vps34-Vps15 复合物抑制 PtdIns 的磷酸化，IC50 约为 25 nM。Vps34-IN-1 可以通过降低 T 环和疏水基序的磷酸化来降低 PtdIns(3)P 水平，从而抑制 SGK3 激活。Vps34-IN-1 调节自噬。
溶解性：DMSO：≥ 31 mg/mL (72.79 mM)
储备液保存：-80°C, 1 year; -20°C, 6 months。
体内实验：1、请依序添加每种溶剂： 10% DMSO→40% PEG300→5% Tween-80→45% Saline Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (5.87 mM); 澄清溶液 此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。 以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；再向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀；然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL。 2、请依序添加每种溶剂： 10% DMSO→90% (20% SBE-β-CD in Saline) Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (5.87 mM); 澄清溶液 此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。 以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中，混合均匀。 2 g SBE-β-CD（磺丁基醚 β-环糊精）粉末定容于 10 mL 的生理盐水中，完全溶解至澄清透明。 3、请依序添加每种溶剂： 10% DMSO→90% Corn Oil Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (5.87 mM); 澄清溶液 此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液，此方案实验周期在半个月以上的动物实验酌情使用。 以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 玉米油中，混合均匀。 注：工作液建议您现用现配，当天使用。 ＜1mg/ml表示微溶或不溶。 普西唐提供的所有化合物浓度为内部测试所得，实际溶液度可能与公布值有所偏差，属于正常的批间细微差异现象。 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
靶点：Vps34:25 nM (IC50)
体外研究：Vps34-IN-1 不会显着抑制其他脂质激酶，包括 I 类 (p110α、p110β、p110γ和p110δ) 和II类 PI3K 的所有三个成员 (PI3KC2α、PI3KC2β 和 PI3KC2γ) 酶。 Vps34-IN-1 (0.01、0.1、1 μM；持续 1 小时) 以剂量依赖性方式抑制 PtdIns(3)P 水平。Vps34-IN-1 (0.01、0.1、1 μM；持续 1 小时) 可诱导 SGK3 活性呈剂量依赖性降低，在1 μM 时最大降低约 60%，在 0.1 μM 时最大降低约 40%。SGK3 活性的抑制伴随着 T 环和疏水基序磷酸化的相应减少。 Vps34-IN-1 (1、2、4 μM；24 小时) 可诱导 SGK3 磷酸化的剂量依赖性抑制。
激酶实验：体外 Vps34 PI3K 试验： 利用放射性脂质体激酶测定的方法，在体外检测了在昆虫细胞表达的重组 Vps34-Vps15复合体的PI3K活性。脂质体通过直径为 100 nm 的滤膜对肝脏的磷脂酰肌醇进行挤压而形成，将其与 50 ng 重组Vps34/15 复合体在 4℃，1000 rev./min 共同孵育 30 min. 测定所用缓冲液为 20mM Tris/HCl, pH7.4, 67mM NaCl, 10mMMnCl2, 0.02% CHAPS and 1mM DTT，并在每个反应中刚加入 5μM ATP and 3μCi [γ-32P]ATP. 加入500μl 氯仿/甲醇/盐酸 (100:200:3.5, 体积比)终止反应，接着用 180 μl 氯仿和 300 μl 0.1M 盐酸进行分相。保留下层油脂层，晾干后加入氯仿。在 Silica 60 TLC plate（硅胶薄层层析板，以1%草酸钾, 5mMEDTA and 50% (v/v)甲醇活化）上观测反应，用包含甲醇/氯仿/水/碳酸氢铵(47:60:11.2:2, 体积比)的试剂户必须进行分离，放射性底物的掺入通过 Fujifilm Image reader FLA-2000 进行分析，并通过AIDA image analysis 定量，IC50 值通过 Prism software 进行非线性回归分析得到。
保存条件：-20℃
注意事项：1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2、以上信息仅做参考交流之用。

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