生物试剂
>
生化试剂
>
信号通路
> PF 5274857
加入收藏 取消收藏

PF 5274857  >98%

促销价¥{{model.attbuying.price}}

市场价¥0.00

累计销量0 累计评价0 人评论

别称 {{model.alias}}
中文名称 {{model.name}}
英文名称 {{model.enname}}
品牌 {{model.brand}}
CAS {{model.cas}}
分子式
分子量 {{model.molecularweight}}
MDL {{model.mdl}}
货号 {{model.procode}}
数量

+ -

件 库存{{model.attbuying.number}}件
立即购买 加入购物车 下载说明书

看了又看
包装规格：2mg 5mg 10mg 50mg 100mg in glass bottle
产品简介：一种有效的、选择性的、具有口服活性和可透过血脑屏障的 Smo 拮抗剂，IC50 值为 5.8 nM，Ki 值为 4.6 nM。PF-5274857 有潜力用于包括激活的 Hh 途径驱动的脑肿瘤和脑转移在内的多种肿瘤的研究。
溶解性：DMSO :125 mg/mL (286.07 mM; 超声助溶) Water：< 0.1 mg/mL (insoluble)
储备液保存：-80°C, 2 years -20°C, 1 year
体内实验：1、请依序添加每种溶剂：10% DMSO→40% PEG300→5% Tween-80→45% Saline Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (4.76 mM); 澄清溶液 此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。 以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；再向上述体系中加入 50 μL Tween-80，混合均匀；然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL。 2、请依序添加每种溶剂：10% DMSO→90% (20% SBE-β-CD in Saline) Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (4.76 mM); 澄清溶液 此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。 以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中，混合均匀。 3、请依序添加每种溶剂：10% DMSO→90% Corn Oil Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (4.76 mM); 澄清溶液 此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液，此方案实验周期在半个月以上的动物实验酌情使用。 以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中，混合均匀。 ＜1mg/ml表示微溶或不溶。 普西唐提供的所有化合物浓度为内部测试所得，实际溶液度可能与公布值有所偏差，属于正常的批间细微差异现象。 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；⼀旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
靶点：IC50: 5.8 nM (Smo); Ki: 4.6 nM (Smo)
体外研究：PF-5274857 completely inhibits Shh-induced Hh pathway activity with an IC50 of 2.7±1.4 nM measured by the transcriptional activity of Smo downstream gene Gli1 in MEF cells. PF-5274857 shows less than 20% inhibition against a broad panel of protein kinases at 1 μM.
体内研究：PF-5274857 (1-30 mg/kg; p.o. once daily for 6 days) shows robust antitumor efficacy and correlation between PK and PD in medulloblastoma allograft mice models. PF-5274857 (10 mg/kg; i.h.) in the plasma is able to cross the blood-brain barrier in rats within 4 hours postdose. PF-5274857 (10-100 mg/kg; p.o. once daily for 4 days) is able to target Smo in the brain leading to the downregulation of Hh pathway activity in the brain tumor. PF-5274857 (30 mg/kg; p.o. once daily for 34 days) increases the survival rates of primary Ptch+/− p53−/− medulloblastoma mice. PF-5274857 (5-30 mg/kg; p.o.) exhibits the apparent volume of distribution of 5.6±0.5 L/kg and the half-life (T1/2) of 1.7±0.1 hours.
激酶实验：生化分析：过表达人源Smo (氨基酸181-787)的HEK293细胞培养在含有10% FBS, Pen–Strep以及 0.1 mg/mL 潮霉素的DMEM培养基中，直到90%密度。用冷的PBS洗过之后, 将细胞用膜制备缓冲液重悬均匀，缓冲液成分包含50 mM Tris-HCl, pH 7.5, 250 mM 蔗糖含有Roche完全蛋白酶鸡尾酒。将上述匀浆离心并用分析缓冲液重悬细胞，分析缓冲液包含50 mM Tris-HCl, pH 7.5, 100 mM NaCl, 25 mM MgCl2, 1 mM EDTA, 和0.1%无蛋白酶BSA,然后在玻璃组织研磨机中使之均匀。含有Smo的总蛋白利用Pierce BCA蛋白分析法来测定。对于竞争性结合实验分析，加入100 μL 分析缓冲液到96孔GF/B 滤板，进行10分钟的滤板预湿润然后去掉。然后加入20 μL 分析缓冲液, 10μL药物的连续稀释液, 20 μL 3H-Smo 拮抗剂 (终浓度3 nM)和50 μL 膜制备品(含有40 μg 总蛋白)。滤板在室温孵育2小时，洗过之后真空晾干。然后滤板在60°C 烘箱中干燥1小时，加入 45 μL Microscint 20，室温孵育30 分钟到1小时, 然后用TopCount闪烁记数器计数。数据用GraphPad Prism软件进行分析。
细胞实验：细胞系：Gli-Luc/MEF 细胞 浓度：50 pM- 3 μM 处理时间：48 小时 方法：Gli-Luc/MEF细胞培养在含有10%热失活FBS, 2mM l-glutamine和0.55 mM β-mercaptoethanol 的DMEM培养基中直到90%细胞密度。第一天, 胰酶消化后的细胞按每孔7,500个接种在白色384孔板中，每孔加入20 μL含有1% 热失活FBS和1 mM 丙酮酸钠的OptiMEM 培养基。平板在37°C和5% CO2环境中培养过夜。第2天, 加入3 μM到50pM的PF-5274857 ，按照3倍连续稀释，然后加入重组鼠源Sonic Hedgehog，终浓度2μg/mL。在37°C，5% CO2条件下细胞与PF-5274857和Shh孵育48小时。第四天利用Bright-Glo 荧光素酶分析系统进行荧光素酶分析。简言之, 每孔培养基中加入25 μL Bright-Glo荧光素酶试剂。室温孵育5分钟然后酶标仪检测数据然后计算PF-5274857的IC50值。
动物实验：动物模型：携带原发性Ptch+/−p53+/−或Ptch+/−p53−/−髓母细胞瘤肿瘤的 SCID-beige 小鼠 剂量：0 mg/kg, 1 mg/kg, 5 mg/kg, 10 mg/kg和30 mg/kg 给药处理：口服
保存条件：-20°C
注意事项：1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2、以上信息仅做参考交流之用。

猜你喜欢