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包装规格:1mg 5mg 25mg 100mg in glass bottle
产品简介:一种微管稳定剂,i:0.71μ。
溶解性:溶于DMSO(≥100mg/mL )
储备液保存:-80°C, 6 months -20°C, 1 month
体内实验:1、请依序添加每种溶剂: 10% DMSO→40% PEG300→5% Tween-80→45% Saline Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (4.09 mM); 澄清溶液 此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL(饱和度未知)的澄清溶液。 以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;再向上述体系中加入 50 μL Tween-80,混合均匀;然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL。 2、请依序添加每种溶剂: 10% DMSO→90% (20% SBE-β-CD in Saline) Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (4.09 mM); 澄清溶液 此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL(饱和度未知)的澄清溶液。 以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中,混合均匀。 3、请依序添加每种溶剂: 10% DMSO→90% Corn Oil Solubility: 2.08 mg/mL (4.09 mM); 澄清溶液; 加热助溶 此方案可获得 2.08 mg/mL的澄清溶液,此方案实验周期在半个月以上的动物实验酌情使用。 以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中,混合均匀。 <1mg/ml表示微溶或不溶。 普西唐提供的所有化合物浓度为内部测试所得,实际溶液度可能与公布值有所偏差,属于正常的批间细微差异现象。 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
靶点:EC0.01: 1.8 μM (Microtubule/Tubulin)
体外研究:Epothilone B inhibits HCT116 cells with IC50 of 0.8 nM in HCT-116 cell line cytotoxicity assay. Epothilone B (Patupilone) is a microtubule (MT) targeting agent. As shown by MTT cell proliferation assay, after 72 h of treatment Epothilone B efficiently inhibits cell growth with an IC50 of 6 nM, while concentrations ≤1 nM are not cytotoxic. Epothilone B significantly inhibits transwell cell migration at the non-cytotoxic concentration of 1 nM, and the effect is more evident at 10 nM. Epothilone B (Patupilone) is a novel, non-taxane-related and nonneurotoxic microtubule-stabilizing agent in human medulloblastoma cell lines. Epothilone B reduces the proliferative activity in the D341 cell line, with an IC50 of 0.53 nM; in the D425Med cell line, with an IC50 of 0.37 nM; and in the DAOY cell line, with an IC50 of 0.19 nM. In the D341Med cell line, the effect of Epothilone B on clonogenic survival is at dose range of Epothilone B similar to the level of proliferative activity and viability (IC50, 0.50-0.75 nM). However, the clonogenicity of D425Med and DAOY cells is already strongly reduced at a 10-fold lower concentration of Epothilone B (IC50, 30 pM). These results overall demonstrate that Epothilone B is highly potent against different medulloblastoma cell lines.
体内研究:Treatment with Epothilone B (Patupilone) or ionizing radiation alone results in a partial tumor growth suppression over 10 days, whereas combined treatment exerts a strong supra-additive tumor growth control, with complete tumor regression in the follow-up period (P<0.005, for ionizing radiation or Epothilone B alone vs combined treatment).
激酶实验:微管蛋白聚合实验: 纯化牛脑微管蛋白(MTP), 包含约15%–20%微管相关蛋白。用于 Epothilone B-微管研究的buffer (MES buffer)含 0.1 M 2-吗啉乙磺酸(MES), 1 mM EGTA, 0.5 mM MgCl2, 和3 M 甘油,pH 为6.6。电子显微镜观察的样本置于碳覆盖火棉胶片包被的网格上(300 个网孔),用2%乙酸铀酰进行负染色。在有或无Epothilone B存在时, 使用分光光度计和恒温调节液体循环器。检测微管装配。温度维持在35oC,350 nm处检测到变浑浊状态(代表聚合物规模)。计算EC0.01。
细胞实验:细胞系:KB3-1, KBV-1, Hela, 和Hs578T细胞 浓度:0–1 μM 处理时间:24 小时测定有丝分裂停顿,72 小时测定细胞毒性。 方法:为了测定有丝分裂受阻和畸变,细胞接种在48孔板中(用台酚蓝染色,测定细胞数)或置于盖玻片上。24小时后,用 Epothilone B处理细胞,在固定时间间隔记录。为了分析毒性, 测定细胞数,用台酚蓝染色记录阳性和阴性。 同时, 盖玻片和培养基上清液中等分的细胞混合,用溶于PBS的Hoechst 33342 染色。在有丝分裂受阻(停在G2-M期)和畸变的时候记录细胞。
动物实验:动物模型:携带RPMI 8226 细胞移植瘤的小鼠 剂量:2.5 mg/kg–4 mg/kg 给药处理:静脉注射
保存条件:-20℃
注意事项:1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 2、以上信息仅做参考交流之用。