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TWS119  ≥98% (HPLC)

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包装规格：5mg 25mg 100mg in glass bottle
溶解性：溶于DMSO(20mg/mL)
产品描述：基本信息 产品编号： T70018  产品名称： TWS119 CAS: 601514-19-6   储存条件 粉末 -20℃ 四年 分子式： C18H14N4O2 溶于液体 -80℃ 四年 分子量： 318.33     化学名：  3-[6-(3-Aminophenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yloxy]phenol Solubility (25°C)：   体外:   DMSO 64mg/mL (201.04mM) Ethanol Insoluble Water Insoluble 体内(现配现用): 5% DMSO+40% PEG 300+5% Tween 80+50% ddH2O 12.5mg/mL ＜1mg/ml表示微溶或不溶。 普西唐提供的所有化合物浓度为内部测试所得，实际溶液度可能与公布值有所偏差，属于正常的批间细微差异现象。 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；⼀旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。   制备储备液   浓度   溶液体积 质量   1mg   5mg   10mg 1mM 3.1414mL 15.7070mL 31.4139mL 5mM 0.6283mL 3.1414mL 6.2828mL 10mM 0.3141mL 1.5707mL 3.1414mL 50mM 0.0628mL 0.3141mL 0.6283mL   生物活性 产品描述 一种有效的糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）抑制剂，IC50:30nM.可诱导胚胎干细胞（ESCs）的神经发生。 靶点 GSK-3β (Cell-free assay) 30nM   体外研究 使用1μM TWS119处理P19细胞，使30-40%细胞进行分化，尤其分化为神经细胞谱，根据正确的神经元形态(通过标准EB形成法，且伴随着TWS119处理，产生60%神经分化)计数TuJ1阳性细胞。TWS119与GSK-3β(K D=126nM)紧密结合，通过表面等离子共振(SPR)量化，IC50为30nM。TWS119作用于小鼠胚胎癌和ES细胞，有效诱导神经分化。TWS119处理肝星状细胞(HSC)，降低β-catenin磷酸化,诱导β-catenin核易位,提高谷氨酰胺合成酶产量，阻碍平滑肌肌动蛋白和Wnt5a合成,但促进胶质蛋白酸性蛋白,Wnt10b,和成对的同源结构域转录因子2c的表达。TWS119触发β-catenin的迅速累积，增强与寡核苷酸（含Tcf和Lef结合的DNA序列）的核蛋白相互作用，且大幅上调Tcf7,Lef1和其他Wnt靶点基因包括Jun,Ezd7(编码Frizzled-7),Nlk (编码Nemo样激酶)。TWS119提高T细胞特定杀伤力和与保护IL-2的产生能力相关的IFN-g释放。最新研究显示TWS119处理多克隆活化人类T细胞，诱导Wnt信号。与表达CD45RO(+)CD62L(-)效应表型的对照激活T细胞相比，这些T细胞具有天然CD45RA(+)CD62L(+)表型，这种作用存在TWS119剂量依赖性。 体内研究 TWS119按30mg/kg计量处理细胞表面，细胞表达低水平CD44和高水平CD62L。   推荐实验方法(仅供参考) 激酶实验： 表面等离子体共振(SPR) 在BIAcore S51仪器上在25oC下在PBS buffer中测量SPR。GSK-3β-GST融合蛋白的相对光单位（11,000-17,000）通过EDC[1-乙基-3-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺]耦合程序固定在S系列CM5生物传感器芯片上。GSK-3β稀释到温和酸性缓冲液(10mM KAc,pH 5.0)中，然后在浓度为20–200μg/ml时注射到传感芯片（事先使用EDC(0.2 M)和N-羟基丁二酰亚胺(NHS,0.05 M)的1:1混合物温育7分钟激活）中，注射7分钟。最后，通过注射7分钟乙醇胺(1 M,pH 8.5)，而阻断生物传感器矩阵的未反应位点。随后,注射TWS119 90秒，浓度不断提高(0,2,4,8,16,32,62.5,125,250,500,和1,000nM),随后300秒，GSK-3β-TWS119复合物解离。使用S51评价软件包对SPR进行测评。在四种不同表面进行两组独立滴定实验的数据值，取平均。假设1:1结合模型，用于测定热力学和动力学结合系数。   细胞实验:   细胞系 大鼠肝星状细胞(HSC) 处理时间 4小时和48小时 方法 使用酶连续灌注而分离雄性Wistar大鼠(体重为500–600g)肝星状细胞，通Nycodenz密度梯度离心而富集。由于其高脂肪含量,HSC富集在梯度离心的上层。HSC培养在含10% FCS,100 U/mL青霉素,和100lg/mL链霉亲和素的DMEM培养基中。细胞按1,000,000个(HSC 7d)和2,000,000个(HSC 1d)的密度接种在每个培养皿(直径6cm)中。HSC培养1和7天，然后使用TWS119处理。使用DMSO制备10mM TWS119储存液。对照组用DMSO单独处理。在无血清条件下，加入TWS119 4小时和48小时。在实验培养基中只加入血清，测定HSC的DNA合成。然后进行western blot分析,免疫荧光染色和RT-PCR，用于测量生物学变化。   动物实验:   动物模型 Pmel-1 TCR-转基因小鼠和pmel-1 ly5.1双转基因小鼠和pmel-1 Thy1.1双转基因小鼠 剂量 30mg/kg 给药处理 腹腔注射
保存条件：-20℃

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