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熔点：234°C
包装规格：5mg 25mg 100mg in glass bottle
溶解性：溶于DMSO (5mg/ml)
产品描述：基本信息 产品编号：R10012 产品名称：RO-3306 CAS: 872573-93-8   储存条件 粉末 -20℃ 四年     分子式： C18H13N3Os2 溶于液体 -80℃ 两年 分子量 351.45 -20℃ 一个月 化学名：  (5Z)-5-(quinolin-6-ylmethylidene)-2-[(thiophen-2-ylmethyl)amino]-1,3-thiazol-4(5H)-one   Solubility (25°C)   体外 DMSO 35mg/mL warmed with 50ºC water bath (99.58mM) Ethanol Insoluble Water Insoluble 体内 现配现用   ＜1mg/ml表示微溶或不溶。 普西唐提供的所有化合物浓度为内部测试所得，实际溶液度可能与公布值有所偏差，属于正常的批间细微差异现象。 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；⼀旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。   制备储备液   浓度   溶液体积 质量   1mg   5mg   10mg 1mM 2.8454mL 14.2268mL 28.4535mL 5mM 0.5691mL 2.8454mL 5.6907mL 10mM 0.2845mL 1.4227mL 2.8454mL 50mM 0.0569mL 0.2845mL 0.5691mL   生物活性 产品描述 一种CDK1/cyclin B1和CDK1/cyclin A的抑制剂。 靶点/IC50 CDK1 (Cell-free assay) PKCδ (Cell-free assay) SGK (Cell-free assay) ERK (Cell-free assay) 20nM(Ki) 318nM(Ki) 497nM(Ki) 1980nM(Ki)   体外研究 RO-3306抑制CDK1/cyclin B1，CDK1/cyclin A，CDK2/cyclin E，和CDK4/cyclin D活性，Ki分别为35nM，110nM，340nM，和>2000nM。HCT116，SW480，和HeLa细胞用RO-3306处理20小时导致细胞周期完全阻滞在G2/M期。HCT116和SW480的增殖被RO-3306有效阻断。RO-3306似乎在癌细胞(HCT116和SW480)中比在非致瘤性细胞(MCF 10A和MCF 12A)中具有更强的促凋亡作用。10μM 浓度的RO-3306有效阻止卵母细胞成熟。   推荐实验方法(仅供参考) 激酶实验： CDK试验 CDK1 cyclin B1，CDK1 cyclin A，CDK2 cyclin E，和CDK4 cyclin D通过均相时间分辨荧光法在96孔格式中测量。实验缓冲液包含25mM Hepes，6.25mM MgCl2，0.003% Tween 20，0.3mg/mL BSA，1.5mM DTT，和如下含量的ATP: 162μM (CDK1)，90mM (CDK2)，或135μM (CDK4)。CDK1和CDK2缓冲液包含10mM MgCl2。测试化合物在20μL实验缓冲液中稀释为它们终浓度的3倍，反应通过加入40μL包含pRB底物(0.185μM)的试验缓冲液起始。板在37°C下连续搅拌培养30分钟，反应通过加入15μL 含1.6μM 抗磷酸pRB抗体(Ser-780)的25mM Hepes，24mM EDTA，和0.2mg/mL BSA终止。再振荡培育30分钟后，加入15μL 包含3nM Lance-Eu-W1024-labeledanti-rabbitIgG和60nM Alophycocyanin共轭的抗-His-6 抗体的25mM Hepes，以及0.5mg/mL BSA，培育1小时。板在Victor-V多标阅读器上以340nm激发波长和615nm与665nm发射波长读取数据。IC50值根据665nm下的读数值进行计算，并归一化为615nm下铕的读数值。Ki值根据公式Ki= IC50/(1 + S/Km )计算，其中S是试验中ATP浓度，Km是相对ATP的Michaelis-Menten常数。对激酶组的抑制活性通过IMAP测定技术确定。   细胞实验:   细胞系 MDA-MB-231 细胞系 浓度 20μM 处理时间 72 h 方法 对数生长期细胞(25,000)接种于96孔板，在37℃培养箱中与CO2一起培养，24小时后，给予不同浓度RO-3306以测定达到50%生长抑制(IC50)的药物浓度。MTT (20μL，包含5mg/mL储备溶液的生理盐水)加入每孔中，细胞培养4小时。移除上清液，来自活细胞的甲瓒晶体溶解在200μL无水DMSO中。吸光度使用550模式酶标仪在565nm波长下检测。
保存条件：-20℃

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